Avaliação dos métodos fenol- clorofórmio e colunas de sílica para extração de dna a partir de tecido ósseo

Autores

  • Alveiro Antonio Alvis-Arango Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses

DOI:

https://doi.org/10.16925/cf.v3i1.1199

Palavras-chave:

DNA, genética forense, identificação de métodos, tecido ósseo

Resumo

Propósito: encontrar fatores para selecionar métodos de extração de material genético como o fenol-clorofórmio e as colunas de sílica a fim de utilizá-los na análise genética, no âmbito das políticas do Governo da Colômbia da Lei de Justiça e Paz. Descrição: fez-se um estudo descritivo que aplicou os dois principais métodos de extração de dna ósseo; analisaram-se amostras-problema que inicialmente não deram resultados reproduzíveis e verificáveis. Ponto de vista: segundo os resultados obtidos, constatou-se que o tempo de digestão para as amostras ósseas submetidas à extração de dna pelo método de colunas de sílica melhora quando se faz às duas horas. Conclusões: o dna extraído pelo método de colunas de sílica é melhor na recuperação, mas deve ser analisado o mais breve possível; do contrário, o material se degrada se for conservado refrigerado. Esse fenômeno não ocorre em extrações com fenolclorofórmio.

Referências

Semana.com. Documentan más de 10.000 casos de cadáveres sin identificar en Colombia. Revista Semana [internet]. 2010 nov 10. Disponible en: http://www.semana.com/nacion/articulo/documentan-mas-10000-casos-cadaveres-identificar-colombia/124363-3

Vallejo G, Alonso A. La identificación genética en grandes catástrofes: avances científicos y normativos en España. Rev Esp Med Legal. 2009;35:19-27.

Crespillo M, Bañón R, Valverde JL. Aprendizaje y reflexiones de la identificación de cadáveres mediante marcadores genéticos monoparentales (ADN mitocondrial, cromosoma Y). A propósito de un caso. Rev Esp Med Legal. 2011;37:17-21.

Barrio-Caballero PA. Revisión de métodos de extracción de ADN a partir de restos óseos en el laboratorio forense. Rev Esp Med Legal. 2013;39(2):54-62.

Instituto Nacional de Justicia. Mass fatality incidents: a guide for human forensic identification. Washington: Departamento de Justicia de Estados Unidos; 2005. Disponible en: https://www.ncjrs.gov/pdffiles1/nij/199758.pdf

Giannelli PC, Imwinkelried EJ, Peterson JL. Reference guide on forensic identification expertise. En: Federal Judicial Center, editor. Reference manual on scientific evidence. 3.a ed. Washington: National Academies Press; 2011. p. 55-128.

Lindahl T. Instability and decay of the primary structure of DNA. Nature. 1993;362:709-15.

Fernández E. Polimorfismos de DNA mitocondrial en poblaciones antiguas de la Cuenca del Mediterráneo [tesis doctoral]. [Barcelona]: Universidad de Barcelona; 2005.

QIAquick PCR purification kit for purification of PCR products, 100 bp to 10 kb. Quiagen, March 2008.

Hänni C, Brousseau T, Laudet V, Stehelin D. Isopropanol precipitation removes PCR inhibitors from ancient bone extracts. Nucleic Acids Res. 1995;23(5):881-2.

Rogan PK, Salvo JJ. Study of nucleic acids isolated from ancient remains. Yearb Phys Anthropol. 1990;33:195-214.

Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T. Molecular cloning: a laboratory guide. 2.a ed. Salem: Cold Spring Harbor Laboratory Press; 1989.

Hagelberg E, Clegg JB. Isolation and characterization of DNA from archaeological bone. Proc R Soc Lond B Biol Sci.1991;244:45-50.

Yang DY, Eng B, Waye JS, Dudar JC, Saunders SR. Improved DNA extraction from ancient bones using silica-based spin columns. Am J Phys Anthropol. 1998;105:539-43.

Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses. Procedimiento estandarizado de trabajo. Extracción orgánica de ADN a partir de tejido óseo y diente. Bogotá: Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses; 2002.

Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses. Procedimiento estandarizado de trabajo. Extracción de ADN a partir de hueso usando columnas de sílice. Bogotá: Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses; 2011.

Pääbo S, Higuchi R, Wilson AC. Ancient DNA and the polymerase chain reaction. J Biol Chem. 1989;264:9709-12.

Higuchi R. Dr Russ’ problem corner. Ancient DNA Newsletter.1992;1:6-8.

Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses. Procedimiento estandarizado de trabajo. Amplificación mediante la utilización de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) múltiplex de los marcadores genéticos tipo STR y amelogenina incluidos en los kits PowerPlex® ESX-17, ESX-16, ESI-17 y ESI-16 y su análisis. Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses; 2011.

Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses. Procedimiento estandarizado de trabajo. Amplificación mediante la utilización de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) múltiplex de los marcadores genéticos tipo STR y amelogenina incluidos en el kit: PowerPlex16 HS System y su análisis. Bogotá: Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses; 2011.

Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses. Procedimiento estandarizado de trabajo. Cuantificación de ADN humano mediante PCR en tiempo real. Bogotá: Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses; 2011.

Applied Biosystems, Curso de HID en el equipo 3130.

Como Citar

1.
Alvis-Arango AA. Avaliação dos métodos fenol- clorofórmio e colunas de sílica para extração de dna a partir de tecido ósseo. Antistio Rev. Cient. INMLCF Colomb. [Internet]. 15º de dezembro de 2015 [citado 6º de dezembro de 2025];2(1):69-74. Disponível em: https://www.revistasforensesmedicinalegalgovco.biteca.online/index.php/an/article/view/1199

Downloads

Não há dados estatísticos.

Publicado

2015-12-15

Edição

Seção

Artigos de reflexão